Rovnako ako úvodné aj druhé kolo dlhodobej slovenskej pohárovej súťaže sa hrá na jeden zápas, a to v termíne 21., resp. 22. septembra 2010. V prípade nerozhodného výsledku po 90 minútach sa duel nepredlžuje, ale hneď nasleduje jedenástkový rozstrel. Šestnástka úspešných mužstiev sa predstaví v 3. kole SP, ktoré sa bude hrať tiež jednokolovo v termíne 19., resp. 20. októbra 2010.
 

Obhajcom celkového prvenstva je ŠK Slovan Bratislava, ktorý si v 2. kole tohtosezónnej edície Slovenského pohára zmeria sily na domácej pôde s FK Púchov (I. liga). Úradujúci slovenský majster zo Žiliny nastúpi vo Vranove nad Topľou proti domácemu účastníkovi tretej najvyššej súťaže MFK. Jediný zástupca III. ligy (štvrtá najvyššia súťaž) ŠK Kremnička privíta corgoňligový tím MFK Dubnica.

Dvojice 2. kola Slovenského pohára vo futbale v sezóne 2010/2011, ktoré vyžrebovali vo štvrtok popoludní na zasadnutí ŠTK SFZ v Bratislave (hrá sa na jeden zápas v termíne 21., resp. 22. septembra, v prípade nerozhodného výsledku po 90 minútach sa duel nepredlžuje, ale hneď nasleduje jedenástkový rozstrel):

Skupina Západ:
FK Slovan Duslo Šaľa (I. liga) - FC Nitra
ŠK Slovan Bratislava - FK Púchov (I.)
FC Petržalka 1898 (I.) - DAC 1904 Dunajská Streda
FK Slovan Nemšová (II.) - FC Spartak Trnava
FC STK 1914 Šamorín (II.) - FC ViOn Zlaté Moravce
TJ Spartak Myjava (II.) - FK Senica
PŠC Pezinok (II.) - ŠK SFM Senec (I.)
ŠK Blava Jaslovské Bohunice (II.) - AS Trenčín (I.)

Skupina Východ:
FK Poprad (II.) - Dukla Banská Bystrica
ŠK Odeva Lipany (II.) - 1. FC Tatran Prešov
FK Spišská Nová Ves (II.) - MFK Košice
MFK Zemplín Michalovce (I.) - MFK Ružomberok
ŠK Kremnička (III.) - MFK Dubnica
MFK Vranov nad Topľou (II.) - MŠK Žilina
ŽP Šport Podbrezová (II.) - MFK Dolný Kubín (I.)
1. HFC Humenné (II.) - MFK Tatran Liptovský Mikuláš (I.)